Die Defense (Verteidigung) einer Mannschaft ist auf dem Feld, wenn diese nicht im Ballbesitz ist. Sie versucht die Ballführende Mannschaft daran zu hindern, Raumgewinne zu erziehlen. In der Defense gibt es folgende Positionen:
Defense Tackles / Nose Guards/ Defensive End / Nose Tackle
Die Defense Line. Diese Spieler stehen der Offense Line unmittelbar gegenüber. Sie versuchen die Laufspielzüge früh zu stoppen oder gar zum Quarterback durchzubrechen und ihn zu Boden zu bringen. In der Defense Line können 3 bis 6 Spieler stehen.
Free Safety
Der letzte Mann. Er muß in der Lage sein, beim Versagen seiner Vorderleute einen durchgebrochenen Gegner zu Boden zu bringen.
Cornerback
Sie haben die Paßenpfänger (Wide Receiver) der Offense zu decken. Dabei dürfen sie ihren Gegenspieler erst berühren, nachdem dieser einen Ballkontakt hatte
Line Backer
Die Linebacker unterstützen die Defense Line beim Tackeln eines Ballträgers. Bei Pässen sind sie für Paßempfänger zuständig, die sich in dem Raum direkt hinter der Defense befinden.
Strong Safety
Er steht auf der Seite, wo sich der Tight End befindet. Sollte der Tight End als Paßenpfänger eingesetzt werden, muß der Strong Safety ihn decken. Ansosnten ist er für das Stoppen von Laufspielzügen über seine Seite verantwortlich.